微生物限度薄膜過(guò)濾法操作流程

1.取相當(dāng)于每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液，加至適量的稀釋劑中，混勻，過(guò)濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數(shù)較多時(shí)，可取適量稀釋劑的供試液1ml過(guò)濾。用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜，沖洗方法和沖洗量同“計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證"。沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基或玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上培養(yǎng)。每種培養(yǎng)基至少制備一張濾膜。
2.陰性對(duì)照試驗(yàn) 取試驗(yàn)用的稀釋液1ml，照上述薄膜過(guò)濾法操作，作為陰性對(duì)照。陰性對(duì)照不得有菌生長(zhǎng)。

　　3.培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 除另有規(guī)定外，細(xì)菌培養(yǎng)48小時(shí)，逐日點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，一般以48小時(shí)的菌落數(shù)報(bào)告;霉菌、酵母菌培養(yǎng)72小時(shí)，逐日點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，一般以72小時(shí)的菌落數(shù)報(bào)告;必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至5～7天進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)并報(bào)告。菌落蔓延生長(zhǎng)成片的平板不宜計(jì)數(shù)。點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)后，計(jì)算各稀釋級(jí)供試液的平均菌落數(shù)，按菌數(shù)報(bào)告規(guī)則報(bào)告菌數(shù)。若同稀釋級(jí)兩個(gè)平板的菌落平均數(shù)不少于15，則兩個(gè)平板的菌落數(shù)不能相差1倍或以上。

　　4.菌數(shù)報(bào)告原則 以相當(dāng)于1g或1ml供試品的菌落數(shù)報(bào)告菌數(shù);若濾膜上無(wú)菌落生長(zhǎng)，以<1報(bào)告菌數(shù)(每張濾膜過(guò)濾1g或1ml供試品)，或<1乘以稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。

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